Morphological and molecular diagnosis of diseases of free-ranging crab-eating foxes (Cerdocyon thous) / [Diagnóstico morfológico e molecular de doenças de cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) de vida livre]

The aim of this study was to investigate the occurrence of diseases in free-ranging wild canids that were roadkill on highways in the State of Espírito Santo, Brazil. PCR tests were performed for the detection of Brucella sp., Babesia sp., Rangelia sp., and Hepatozoon sp. in the spleen. Morphological evaluation and identification of parasites was performed in the liver and lung. Twenty specimens of C. thous were necropsied at the Animal Pathology Sector of the Veterinary Hospital of the Universidade Federal do Espírito Santo. Tissue samples were processed for histopathological examination and polymerase chain reaction (PCR) analysis. There was no PCR amplification of genomic DNA sequences of Brucella sp., Babesia sp., Rangelia sp., and Hepatozoon sp. using DNA extracted from the spleen as template. Histologically, lesions associated with parasitism by Platynosomum sp. and Angiostrongylus sp. were observed in the liver and lung, respectively. This is the first report of Platynosomum sp. and Angiostrongylus sp. parasitism in C. thous in the state of Espírito Santo, Brazil. Therefore, this study demonstrated parasitism of crab-eating foxes by Platynosomum sp. and Angiostrongylus sp. Importantly, no evidence of infection with Brucella sp., Babesia sp., Rangelia sp., and Hepatozoon sp. was obtained by PCR analysis.(AU)

O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de doenças em canídeos silvestres de vida livre que foram atropelados em rodovias no estado do Espírito Santo, Brasil. Testes de PCR foram realizados para a detecção de Brucella sp., Babesia sp., Rangelia sp. e Hepatozoon sp. no baço. A avaliação morfológica e a identificação de parasitas foram realizadaa no fígado e no pulmão. Vinte espécimes de C. thous foram necropsiados no Setor de Patologia Animal do Hospital Veterinário da Universidade Federal do Espírito Santo. Amostras de tecido foram processadas para exame histopatológico e análise de reação em cadeia da polimerase (PCR). Não houve amplificação por PCR das sequências de DNA genômico de Brucella sp., Babesia sp., Rangelia sp. e Hepatozoon sp. usando-se DNA extraído do baço como modelo. Histologicamente, lesões associadas ao parasitismo por Platynosomum sp. e Angiostrongylus sp. foram observadas no fígado e no pulmão, respectivamente. Este é o primeiro relato de Platynosomum sp. e Angiostrongylus sp. parasitismo em C. thous no estado do Espírito Santo, Brasil. Portanto, este estudo demonstrou parasitismo de cachorro-do-mato por Platynosomum sp. e Angiostrongylus sp. É importante detacar que não há evidências de infecção por Brucella sp., Babesia sp., Rangelia sp. e Hepatozoon sp. por análise de PCR.(AU)

Detection of enteric viruses in pancreas and spleen of broilers with runting-stunting syndrome (RSS) / Detecção de vírus entéricos em pâncreas e baço de frangos com a síndrome de nanismo e raquitismo (RSS)

Enteric disease is a multifactorial problem in chickens, which causes gastrointestinal alterations, elevated feed conversions and impairment. In the last years, several enteric viruses were implicated in enteric disease; case reports have shown their presence alone or in concomitant infections during outbreaks and have suggested that they might be determining factors in the aetiology of enteric disease. This study shows high detection rates of enteric viruses in the pancreas and spleen in samples from an outbreak of enteritis and malabsorption in 16 chicken flocks (n=80 broilers). Avian nephritis virus (ANV) was the most ubiquitous virus, present in 75% of the flocks followed by avian rotavirus group A (ART-A) with 68.75%, and by chicken astrovirus (CAstV) and chicken parvovirus (ChPV) in 43.75% of samples. Viruses were present in the pancreas of positive flocks at extremely high rates: 100% for ART-A, 91.7% for ANV, 100% for CAstV and 57.14% for ChPV. By contrast, only 16.7% and 57.14% of intestine samples were positive for ANV and CAstV, respectively. Avian reovirus (AReo) and avian adenovirus group 1 (FAdV-1) were not detected. These results suggest that high viral detection rates in pancreas samples may be a result of viremia during enteric disease, with subsequent damage of the exocrine pancreas, leading to runting-stunting syndrome (RSS).(AU)

A doença entérica é um problema multifatorial em galinhas que causa alterações gastrointestinais, conversão alimentar elevada e deficiência de crescimento. Nos últimos anos, os vírus entéricos foram associados à doença entérica; casos reportados mostraram a infecção de um único vírus e também infecções concomitantes durante os surtos sugerindo a presença de múltiplos fatores etiológicos nas doenças entéricas. Este estudo mostra uma alta taxa de detecção dos vírus entéricos em amostras de pâncreas e baço de um surto de enterite e má-absorção em 16 lotes de frangos (n=80 frangos). O vírus de nefrite aviária (ANV) foi o vírus mais detectado, estando presente em 75% dos lotes seguido pelo rotavírus aviário grupo A (ART-A) em 68,75% dos casos, e pelo astrovirus (CAstV) e parvovírus aviários (ChPV), ambos em 43,75% das amostras. Os vírus estavam presentes no pâncreas dos lotes positivos em percentuais elevados: 100% para ART-A e CAstV; 91,7% para ANV, e em 57,14% para ChPV. Em contraste, somente 16,7% e 57,14%, em amostras de intestino, foram positivos para ANV e CAstV, respectivamente. Reovírus aviário (AReo) e o adenovírus do grupo 1 (FAdV-1) não foram detectados. Estes resultados sugerem que os elevados percentuais de vírus detectados em amostras de pâncreas podem estar associados à viremia durante a doença entérica, com subsequente lesão no pâncreas exócrino das aves levando ao desenvolvimento da síndrome de nanismo e raquitismo.(AU)

Spleen evaluation using contrast enhanced ultrasonography and Doppler in dogs with subclinical ehrlichiosis / Ultrassonografia por contraste com microbolhas e Doppler na avaliação do baço de cães com erliquiose subclínica

The aim of this study was to evaluate the splenic parenchyma of dogs with subclinical ehrlichiosis using Doppler and contrast-enhanced ultrasonography and provide reference values for this organ in affected animals. Seventeen dogs naturally infected with E. canis were selected for this study. Splenic parenchyma echotexture and echogenicity, size and borders were determined by ultrasound scan. The vascular indices of the splenic artery were determined by Doppler. SonoVue, at 0.1mL per animal, was used in microbubble contrast-enhanced ultrasonography to determine wash in, wash out and peak enhancement time in the splenic tissue. B-mode ultrasonography revealed splenomegaly with rounded borders, heterogeneous echotexture and mixed echogenicity. The vascular indices of the splenic artery were: systolic velocity of 22.59±8.07cm/s, diastolic velocity of 5.25±4.66cm/s and resistance index of 0.71±0.14; values not yet reported in Veterinary Medicine. Contrast-enhanced ultrasonography recorded wash in time of 5.31±0.7s, peak enhancement time of 18.56±2.90s and wash out time of 94.56±35.21s. The combination of conventional ultrasonography of the spleen and hemodynamic evaluation by Doppler and contrast-enhanced ultrasonography is important for the diagnosis of canine ehrlichiosis and could help monitor the clinical evolution of subclinical cases.

O objetivo deste estudo foi avaliar o parênquima esplênico de cães com erliquiose na fase subclínica, por meio do Doppler e da ultrassonografia por contraste com microbolhas. Dezessete cães naturalmente infectados por E. canis na fase subclínica foram selecionados para este estudo. Por meio da ultrassonografia, avaliou-se a ecotextura, a ecogenicidade, o tamanho e os bordos do baço e, pelo Doppler, foram determinados os índices vasculares da artéria esplênica dos cães. Para a avaliação por contraste com microbolhas, foi utilizado SonoVue, na dosagem de 0,1mL por animal, e determinou-se o tempo de entrada e saída, bem como o pico de realce no tecido esplênico. Ao exame modo-B, foram observadas esplenomegalia com presença de bordas arredondadas, ecotextura heterogênea e ecogenicidade mista do baço. Ao Doppler, foram encontrados valores para os índices vasculares da artéria esplênica: velocidade sistólica: 22,59±8,07cm/s; velocidade diastólica: 5,25±4,66cm/s; e índice de resistência: 0,71±0,14, valores ainda não descritos em veterinária. Pela ultrassonografia com contraste, observaram-se valores para wash-in de 5,31±0.7s, pico de realce de 18,56±2.90s e wash-out de 94,56±35.21s. A ultrassonografia convencional do baço de cães com erliquiose, associada com a utilização do método Doppler e a ultrassonografia contrastada, é uma importante ferramenta na triagem diagnóstica e pode auxiliar a monitoração e a evolução de animais na fase subclínica.

Cytokine gene expression and molecular detection of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosisin organs of experimentally infected mice / Expressão de citocinas e detecção molecular de Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis em órgãos de camundongos infectados experimentalmente

Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP) can infect ruminants and remain subclinical for long periods within herds. The identification of organs that are more susceptible to infection and the evaluation of cytokine expression at the site of infection are important to understand the pathogenesis of MAP. In this study, the probability of detection of MAP-DNA and the expression of cytokines in organs of C57BL/6 mice infected intraperitoneally for 120 days were evaluated. Among the evaluated organs, the spleen (85%), colon (75%) and liver (60%) had the highest frequency of positivity. When compared these frequencies between organs, it has been found that the spleen had 1.54 times as likely to be positive in relation to the ileum, and 2.0 times more likely in relation to the Peyer's patches. In addition, at 60 days post-infection, the spleen and the liver were responsible for upregulation of IFN-γ , and the ileum by TNF-α and IL-4. The results indicate that the spleen is the best organ for evaluating an experimental infection by MAP, especially in the initial stages of the infection. Moreover, it showed that the spleen, liver and ileum have a direct role in the inflammatory response in experimental models.

Mycobacterium avium subespécie paratuberculosis (MAP) pode infectar ruminantes e permanecer subclínica por longos períodos nos rebanhos. A identificação de órgãos mais susceptíveis à infecção e a avaliação da expressão das citocinas no local da infecção são importantes para compreender a patogênese de MAP. Neste estudo foi avaliada a probabilidade de detecção de DNA de MAP e a expressão de citocinas em órgãos de camundongos C57BL/6 infectados por via intraperitoneal durante 120 dias. Dentre os órgãos avaliados, o baço (85%), cólon (75%) e fígado (60%) tiveram as maiores frequências de positividade. Quando comparadas essas frequências entre os órgãos, verificou-se que o baço teve 1,54 vezes mais probabilidade de ser positivo em relação ao íleo, e 2,0 vezes mais probabilidade em relação às placas de Peyer. Além disso, aos 60 dias pós infecção, o baço e o fígado foram responsáveis pela maior expressão de IFN-γ e o íleo pela TNF-α e IL-4. Os resultados indicam que o baço é o melhor órgão para avaliar uma infecção experimental por MAP, principalmente nos períodos iniciais da infecção. Além disso, demonstrou que o baço, fígado e íleo têm importância direta na resposta inflamatória de modelos experimentais.

Detección de antígenos del virus del dengue en tejidos post mórtem / Detection of dengue virus antigen in post-mortem tissues

El panorama epidemiológico del dengue ha empeorado durante la última década. Las dificultades para prevenir su transmisión, así como la ausencia de una vacuna o tratamiento específico, lo convierten en un riesgo que desafía las medidas de salud pública y desborda la capacidad de los centros de salud y los sistemas de investigación a muchos niveles. Actualmente, la mayoría de los estudios sobre la patogenia de la infección centran su atención en la respuesta inmunitaria de las células T casi exclusivamente en infecciones secundarias y están dirigidos a identificar los mecanismos implicados en el desarrollo de la permeabilidad vascular y de los eventos hemorrágicos que lo acompañan. En este reporte se describe el caso de una menor de 45 días de edad con signos clínicos de dengue grave, cuyo diagnóstico se confirmó por reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa en muestras de tejido post mórtem y por herramientas de apoyo diagnóstico de inmunohistoquímica, las cuales detectaron antígenos virales en todos los órganos obtenidos en la necropsia. Este caso subraya la importancia del estudio de las infecciones primarias asociadas a dengue grave, particularmente en niños, en quienes es más probable el desarrollo de la forma grave de la enfermedad sin una infección previa, y, además, pone de relieve la importancia de un diagnóstico que no se limite a las muestras de tejido hepático en el estudio de la patogenia de la infección viral.

The epidemiological situation of dengue has worsened over the last decade. The difficulties in preventing its transmission and the absence of a vaccine or specific treatment have made dengue a serious risk to public health, health centers and research systems at different levels. Currently, most studies on the pathogenesis of dengue infection focus on the T-cell immune response almost exclusively in secondary infections and are aimed at identifying the mechanisms involved in the development of vascular permeability and bleeding events that accompany the infection. This report describes the case of a baby girl less than 45 days of age with clinical signs of severe dengue, whose diagnosis was confirmed by reverse transcription polymerase chain reaction in post-mortem tissue samples and by the ancillary diagnostic use of immunohistochemistry, which detected viral antigens in all organs obtained at autopsy. This case highlights the importance of studying primary infections associated with severe dengue, particularly in children, who are more likely to develop the severe form of the disease without previous infection, and it further stresses the importance of a diagnosis that should not be based solely on the examination of liver tissue samples when studying the pathogenesis of the viral infection.

Detection of coxsackie virus B3 gene in myocardium and spleen samples in myocarditis with sudden death / 法医学杂志

OBJECTIVE@#To detect the Coxsackie virus B3(CVB3) gene in myocardium and spleen tissues in viral myocarditis(VMC) with sudden death and to explore the diagnostic method for VMC by means of seeking pathogene.@*METHODS@#By in situ RT-PCR, the detection of CVB3 gene in myocardium and spleen sections were performed in sudden death group caused by VMC and non-cardiac death group.@*RESULTS@#In VMC group, CVB3 gene-positive signals were seen in myocardium sections(3 out of total 8 cases, No. 1, 4, 7 cases) and spleen sections(4 out of total 8 cases, No. 2, 4, 6, 7 cases). In non-cardiac death group, no positive signals were detected in both myocardium and spleen tissues.@*CONCLUSION@#Positive detection of CVB3 gene in both myocardium and spleen maybe an important character of VMC and can improve the detecting pathogene in diagnosing VMC.

Abortion due to equine herpesvirus in southern Brazil

We report an outbreak of abortion due to equine herpesvirus (EHV) in 5 mares between 9 and 11 months of gestation, from a herd of 22 Thoroughbred mares. Equine herpesvirus was isolated from extracts of the liver, spleen and thymus but not from the lungs of a 9-month fetus grown in Rabbit Kidney (RK13) cells. The virus was identified by electron microscopy, where virus particles could be seen in the nucleus of infected cells, and by the fluorescent antibody technique with polyclonal antibodies against the whole virus. Anamnesis, necropsy, histopathology, bacteriology, and virology data suggest that the abortions reported in this paper were due to equine herpesvirus.